期刊简介

本刊登载内容为人与动物病毒、植物病毒、昆虫病毒、噬菌体和病毒基础理论研究和应用研究的新成就,新进展。读者对象为病毒学、微生物学、免疫学等领域的科研和教学工作者以及病毒学的医务工作者。是自然科学的核心期刊。在国外是MEDLINE、MEDLARS数据库,《化学文摘》CA,《生物学文摘》BA等的来源刊,在国内是《中国学术期刊文摘》、《中国医学文摘》、《中国生物医学文摘》等的来源刊。已经加入中国期刊网、万方数据“数字化期刊群”等网络。主要栏目有论著、简报、综述、述评、信息。

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  • 杂志名称:病毒学报杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中国微生物学会
  • 国际刊号:1000-8721
  • 国内刊号:11-1865/R
  • 出版周期:
期刊荣誉:中国科技核心期刊期刊收录:
病毒学报杂志2010年第01期

靶向HIV-1 vif的高效人工miRNA的构建及慢病毒介导的体外抗病毒研究

张涛;程通;魏丽华;张雅丽;王颖彬;蔡毅君;张军;夏宁邵

关键词:RNA干扰, HIV-1, vif, 人工miRNA
摘要:RNAi在HIV-1的治疗研究中得到了广泛的应用,构建高效并且安全的RNAi抗病毒元件是开展相关研究的基础.vif37是以前的研究中筛选获得的靶向HIV-1 vif的高抑制效率兼具保守性的RNAi靶点.miRNA在抑制效率和启动子的选择上比常用的shRNA具有优势.本研究探索以人工miRNA结构引发vif37靶点对应的RNAi.本研究以天然的miR-155前体为骨架,采用步移的方式设计了3个靶向vif37的人工miRNA,以RNA聚合酶Ⅱ类启动子指导表达.miRNA表达质粒和HIV-1的感染性克隆pNL4-3共转染的结果显示,3个人工miRNA中只有miR-vif37H具有抑制效果,效率与shRNA-vif37相当.与携带靶序列的荧光索酶报告质粒共转染实验证明miR-vif37H具有良好的抑制特异性.用表达miR-vif37H的重组慢病毒转导HIV-1的敏感细胞MT-4,克隆化后获得稳定表达miR-vif37H的细胞株MT-4-miR37H,该细胞可以有效抑制HIV-1的体外复制.实时RT-PCR检测结果显示,与shRNA-vif37相比,miR-vif37H的表达水平明显下降,安全性更好.进一步的实时RT-PCR检测结果还显示,miR-vif37H在细胞内的稳定表达不会影响内源代表性miRNA(miR-181和miR-16)的加工以及干扰素应答相关基因Stat1的mRNA水平.miR-vif37H是一个特异的高效RNAi元件,为vif37靶点的进一步应用研究奠定了基础.